Vitamin C dietary supplementation influence tadpoles of bullfrog Lithobates catesbeianus reared in low water temperature / A suplementação da dieta com vitamina C influencia os girinos de rã-touro Lithobates catesbeianus criados em baixa temperatura da água

Vitamin C supplementation is important for the growth and development of bullfrog tadpoles under optimum water temperature conditions. Therefore, an experiment was carried out to evaluate the effects of vitamin C supplementation on the diet of bullfrog tadpoles at a low temperature. A total of 480 tadpoles with a mean weight of 0.078 g were distributed in 12 aquariums each containing 40 L of water in a closed water recirculation system. The experimental design was entirely randomized with four treatments (0, 150, 300, and 600 mg kg-1 of L-ascorbic acid monophosphate) and three replicates. The productive performance was measured by the weight gain, feed conversion, diet consumption, protein efficiency, carcass yield, hepatosomatic index, viscerosomatic index, visceral fat index, dry matter, and ethereal carcass extract. The water temperature during the experimental period was 21.74 ± 0.43 °C. Vitamin C supplementation did not influence carcass yield and viscerosomatic index. However, there was a quadratic effect of vitamin C supplementation on the weight gain, apparent feed conversion, protein efficiency, visceral fat index, hepatosomatic index, and ethereal carcass extract. Based on these results, bullfrog tadpoles should be supplemented with 600 mg vitamin C kg-1 of the diet when subjected to water temperatures of around 22 °C.(AU)

A suplementação de vitamina C é importante para o crescimento e desenvolvimento de girinos de rã-touro sob condições ótimas de temperatura da água. Desta forma, foi realizado um experimento para avaliar o efeito da suplementação de vitamina C sobre a dieta de girinos de rã-touro em baixa temperatura. O experimento foi realizado com 480 girinos com peso médio de 0,078g, distribuídos em 12 aquários com 40L de água em sistema fechado de recirculação de água. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro tratamentos (0, 150, 300 e 600 mg kg-1 de monofosfato de ácido L-ascórbico) e três repetições. O desempenho produtivo foi avaliado por meio de ganho de peso, conversão alimentar, consumo de ração, eficiência proteica, rendimento de carcaça, índice hepatossomático, índice viscerossomático, índice de gordura visceral, matéria seca e extrato etéreo de carcaça. A temperatura da água durante o período experimental foi de 21,74 ± 0,43 °C. A suplementação com vitamina C não influenciou o rendimento de carcaça e o índice viscerossomático. No entanto, houve efeito quadrático da suplementação com vitamina C sobre o ganho de peso, a conversão alimentar aparente, a eficiência protéica, o índice de gordura visceral, o índice hepatossomático e o extrato etéreo de carcaça. Com base nos resultados do presente estudo, os girinos de rã-touro devem ser suplementados com 600 mg vitamina C kg-1 da dieta quando submetidos em temperaturas médias de 22 °C.(AU)

Cat epididymal semen cryopreserved with and without vitamin E: effect on sperm parameters and lipid peroxidation.

The aims of this study were to investigate: 1) if the addition of α-tocopherol (vitamin E) in three concentrations (0.3, 0.6 and 0.9 mM) is able to preserve spermatozoa integrity after thawing and 2) the effect of α-tocopherol supplementation on lipid peroxidation. Fifty four domestic cats were used in this study constituting 18 pools (3 cats per pool). Each pool was submitted at four experimental groups: group 0 (control) - epididymal sperm were frozen with a commercial Botucrio® extender; group 0.3, group 0.6 and group 0.9 - the extender was supplemented with 0.3, 0.6 and 0.9 mM of α-tocopherol, respectively. Each semen sample was evaluated for motility, progressive forward motility, morphology, sperm viability (plasma membrane integrity-PMI), hypo-osmotic swelling test (HOST), before and after thawing. The evaluation of lipid peroxidation reaction by Thiobarbituric Acid Reactive Substances (TBARS) test was performed on thawed semen only. Results demonstrated that there was no significant difference between control and the three α-tocopherol groups with regards to motility and progressive motility after thawing (P > 0.05). As expected, in fresh samples viability was significantly higher than in all the cryopreserved groups in which there was no positive influence of any of the α-tocopherol concentration used. Lipid peroxidation was higher in the supplemented groups 0.6 and 0.9 mM of α-tocopherol than in control and in 0.3 mM group. In conclusion, the addition of α-tocopherol to the commercial extender had no positive influence on reduction of lipid peroxidation. This topic deserves further investigations to better understand the effect of cryopreservation procedures on epididymal spermatozoa and to establish adequate strategies to counteract sperm cryodamages.

Fecal collection methods for the determination of protein digestibility in bullfrogs / Métodos de coleta de fezes para determinação da digestibilidade proteica em rã-touro

Adequate methods for the determination of protein digestibility in bullfrogs are important for the understanding of nutrient utilization. Therefore, this study evaluated two methods of feces collection: intestinal dissection and fecal decantation, using cylindric-conical tanks. Frogs were fed with a commercial diet (45% crude protein) which was ground and supplemented with 0.5% chromium oxide III. The frogs were fasted 48h before force-feeding (5% of the animal's live weight). For the decantation method, the animals were sacrificed 36 h after force-feeding and feces were collected directly from the large intestine. For the sedimentation method, feces were collected when they appeared in the tubes attached to the front end of the cylindric tanks. No significant difference (P>0.05) in the apparent digestibility coefficients of crude protein for dietary was observed between the methods tested (74.0% and 76.4% for the dissection and decantation methods, respectively). In conclusion, both methods can be used for the determination of protein digestibility of bullfrog feeds.

A avaliação de metodologias adequadas para a determinação da digestibilidade proteica em rã-touro é de grande importância para o entendimento do aproveitamento dos nutrientes. Neste estudo, foram avaliados dois métodos de coleta de fezes, um por dissecação intestinal e outro por decantação de fezes, utilizando-se aquários de coleta de fezes para peixes. Os animais receberam uma ração comercial (45% PB), a qual foi moída e adicionado 0,5% de óxido de crômio III. As rãs permaneceram 48 horas em jejum antes da alimentação forçada (5% do peso vivo das rãs). No método de dissecação, os animais foram sacrificados 36 horas após a alimentação forçada e as fezes coletadas diretamente do intestino grosso. No método de decantação, as fezes foram coletadas assim que apareciam nos tubos fixados na extremidade anterior dos aquários cilíndricos. Verificou-se que não houve diferença significativa (P>0,05) nos coeficientes de digestibilidade aparente da proteína bruta (CDAPB) da ração entre as metodologias testadas, sendo de 74,0% e 76,4%, respectivamente, para o método de dissecação e decantação. Concluiu-se que ambas as metodologias podem ser utilizadas para a determinação da digestibilidade proteica de alimentos para rã-touro.

Influence of the number of feeding environments on the performance of bullfrog tadpoles / Influência do número de ambientes de alimentação no desempenho de girinos de rã-touro

Feeding is one of the major factors that influences the growth and development of animals, justifying thus the present experiment that analyzed the effect of the number of feeding environments on the performance of bullfrog tadpoles through the growth (weight and length) and performance (food remains, average feed intake, average weight gain, and feed conversion). The treatments consisted of subunits of two, four, and eight feeding environments in the experimental units at disposal for the tadpole population, and one without subdivisions, comprising a single environment, during 60 experimental days. The design was completely randomized, with four treatments and three replications. The values were tested using an analysis of variance and Duncan test (α = 0.05). The growth in weight and length and the indices of animal performance were influenced by the number of feeding environments, with the best results found for the treatments with four and eight environments, and the worst, for the treatment with a single environment. The increased number of feeding environments may be an alternative to improve the performance of bullfrog tadpoles.

Alimentação íntegra a um conjunto de fatores que influenciam o crescimento e o desenvolvimento dos animais. Com isso, foi realizado o experimento com o objetivo de verificar pelo crescimento (peso e comprimento) e o desempenho (sobras diárias de ração, consumo médio de ração, ganho de peso médio e conversão alimentar) dos girinos de rã-touro a influência do número de ambientes de alimentação no desempenho de girinos de rã-touro. Os tratamentos foram subdivisões em dois, quatro e oito ambientes de alimentação das unidades experimentais em relação à população de girinos e um sem subdivisões com único ambiente, durante 60 dias experimentais. O delineamento foi inteiramente casualizado, com quatro tratamentos e três repetições. Os valores encontrados foram submetidos à análise de variância e ao teste de Duncan (α = 0,05). O crescimento em peso e comprimento e os índices de desempenho zootécnicos foram influenciados pelo número de ambientes de alimentação, sendo que os melhores resultados foram para os tratamentos com quatro e oito ambientes e o piores para com único ambiente. O aumento do número de ambientes de alimentação pode ser uma alternativa para melhorar o desempenho dos girinos de rã-touro.

Liver histopathological changes in breeding bullfrogs / Alterações histopatológicas do fígado de reprodutores de rã-touro

In order to complement the histopathological study of juveniles and tadpoles of the bullfrog, Lithobathes catesbeianus, fed commercial diet used by frog farms in Rio de Janeiro, containing 40% crude protein, we performed necropsy and histopathology of the liver to establish a relationship between the quality of crude protein in the diet and animal health. For this, it was used twenty breeding male bullfrogs, with average weight 591.30 g (± 91.90 g) and length 165.02 mm (± 14.22 mm), and ten females with average weight and length of 629.80 g (± 134.47 g) and 169.32 mm (± 21.82 mm). The liver histopathology showed hyperemia, high number of elanomacrophages and cytoplasmic rarefaction, probably due to protein deficiency and fatty liver degeneration and presence of inflammatory processes. These lesions indicate a degenerative nutritional process. These findings suggest that the animals were fed with proteins of low biological value, indicating poor quality of feed, undermining the sanity. The impairment of liver function by these injuries will lead to reduced availability of precursors of sex hormones, since the liver is important in the metabolism of the same, and reproductive performance of these animals may be impaired.

Em complementação ao estudo histopatológico de girinos e imagos da rã-touro, Lithobates catesbeianus, alimentados com ração comercial utilizada pelos ranários do Rio de Janeiro, contendo 40% de proteína bruta, realizou-se necropsia e histopatologia do fígado de reprodutores, procurando uma relação entre a qualidade de proteína bruta na ração e a sanidade do animal. Foram utilizados 20 reprodutores de rã-touro, dez machos com peso de 591,30 g (± 91,90 g) e comprimento médios de 165,02 mm (± 14,22 mm), e dez fêmeas com peso e comprimento médios de 629,80 g (± 134,47 g) e 169,32 mm (± 21,82 mm). Os resultados da histopatologia mostraram que o fígado dos reprodutores, tanto machos quanto fêmeas apresentavam hiperemia, grande número de melanomacrófagos e rarefação citoplasmática provavelmente por deficiência proteica e quadro de degeneração hepática gordurosa. Tais lesões indicam quadro degenerativo nutricional. Também presente processos inflamatórios focais. Estes achados sugerem uma alimentação com proteínas de baixo valor biológico, indicando má qualidade da ração, comprometendo sua sanidade. Pode-se inferir que o comprometimento das funções hepáticas, irá diminuir a disponibilidade de precursores dos hormônios sexuais, pois o fígado é importante na metabolização dos mesmos, e a performance reprodutiva destes animais poderá ser prejudicada.

Evaluation of the semen characteristics after induced spermiation in the bullfrog Lithobates catesbeianus / Características e avaliação do sêmen de rã-touro Lithobates catesbeianus induzidos à espermiação

Evaluation of semen characteristics after hormonal induction of the bullfrog could provide valuable information on the gametes of this species, which may be useful for projects related to artificial fertilization, animal improvement, and cryopreservation. Bullfrog males were induced to spermiate with buserelin acetate (GnRHa), and their semen was subsequently analyzed. GnRHa (0.4 µg) was administered to the bullfrog males with secondary sexual characteristics such as weight > 200 g, yellow chin, nuptial callus, and amplexus reflex, being the semen collected after 60 min. The semen volume was 5.76 mL, light-colored. The other characteristics of the semen were: vigor of 4.80, motility of 93%, concentration of 14.24 × 106 mL-1, and content of normal spermatozoa of 70%. The volume, color, vigor, motility, sperm concentration, and content of normal spermatozoa were adequate in these bullfrog semen samples. Evaluation of the bullfrog semen samples based on this set of parameters is essential for decision-making about the quality and destination of the semen.

Avaliação de que as características do sêmen, após a indução hormonal da rã-touro, pode fornecer informações valiosas sobre os gametas desta espécie, podendo ser útil para projetos relacionados à fertilização artificial, melhoramento animal, e criopreservação. Machos de rã-touro foram induzidos à espermiação com acetato de buserelina (GnRHa) e o sêmen foi posteriormente analisado. GnRHa (0,4 mg) foi administrado à rã- touro do sexo masculino com características sexuais secundárias, tais como peso superior a 200 g, papo amarelo, calo nupcial, e reflexo amplexo, e seu sêmen foi coletado após 60 min. O sêmen da rã-touro apresentou volume de 5,76 mL, coloração turva, vigor espermático de 4,80; motilidade espermática de 93%, concentração de 14,24 x 106 SPTZ mL-1 e 70% de espermatozoides normais. O volume, cor, vigor, motilidade, concentração espermática e o número de espermatozoides normais das amostras do sêmen de rã-touro são adequados. O conjunto dos parâmetros para avaliação das amostras de sêmen de rã-touro é indispensável para a tomada de decisão sobre a qualidade e destino do mesmo.

Buserelin acetate-induced spermiation in Leptodactylus ocellatus and evaluation of semen characteristics / Espermiação com acetato de buserelina em Leptodactylus ocellatus e avaliação de características seminais

By understanding the hormonal action behind the induction of spermiation in Leptodactylus ocellatus can help in the collection of semen for artificial insemination and cryopreservation. The experiments were conducted at the Experimental Frog Farm of the Federal University of Viçosa. Seven L. ocellatus males with the following secondary sexual characteristics were selected: black thorns, developed forelimbs, and amplexus reflex. Spermiation was induced in these animals by applying daily 0.4 µg buserelin acetate hormone (GnRHa) for 7 days, being the semen collected 90 min after the application. The volume, color, vigor, motility, sperm concentration, and spermatozoa morphology were subsequently evaluated. Three animals responded to GnRHa induction, enabling the collection of seven samples of semen, and the first sample was collected 97.5h after the first application. The semen of the creole frog presented the following characteristics: an average volume of 0.38 mL, murky color, sperm vigor of 3.71, sperm motility of 77.14%, sperm concentration of 6.60 x 106 SPTZ mL-1, and 69% of normal sperm. GnRHa can induce spermiation in the creole frog. Although the volume of collected semen was low, the color, vigor, motility, concentration, and spermatozoa content showed to be adequate.

O conhecimento da ação de hormônios na indução à espermiação de Leptodactylus ocellatus pode permitir a coleta de sêmen para estudos de fertilização artificial e criopreservação. O experimento foi realizado no Ranário Experimental da Universidade Federal de Viçosa, onde sete machos de L. ocellatus com as características sexuais secundárias: acúleos negros, membros anteriores desenvolvidos e reflexos ao amplexo foram induzidos à espermiação com aplicação do hormônio acetato de buserelina (GnRHa) na dosagem de 0,4 µg, durante sete dias a cada 24h e o sêmen coletado após 90 min. O volume, cor do sêmen, vigor espermático, motilidade espermática, concentração espermática e morfologia dos espermatozoides foram avaliados. Três animais responderam à indução pelo acetato de buserelina permitindo a coleta de sete amostras de sêmen, a primeira após 97,5h da primeira aplicação. O sêmen da rã-manteiga apresentou volume médio de 0,38 mL, coloração turva, vigor espermático de 3,71; motilidade espermática de 77,14%, concentração de 6,60 x 106 SPTZ mL-1 e 69% de espermatozoides normais. O acetato de buserelina pode induzir à espermiação da rã-manteiga. O volume seminal coletado foi baixo, mas a coloração, vigor, motilidade, concentração e número de espermatozoides de L. ocellatus foram adequados.